全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀－高效液相色譜法檢測(cè)雞蛋中氟蟲腈殘留量
1 前言
氟蟲腈是一種苯基吡唑類殺蟲劑、殺蟲譜廣，其作用機(jī)制在于阻礙昆蟲γ-氨基丁酸控制的氯化物代謝，因此對(duì)蚜蟲、葉蟬、蠅類等重要害蟲有很高的殺蟲活性。采用海能全自動(dòng)固相萃取儀-高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)動(dòng)物源性食品中磺胺類藥物殘留，有效的縮短樣品中目標(biāo)物的固相凈化所需要的時(shí)間，提高了工作效率，也節(jié)約了人力；且能精準(zhǔn)的控制上樣、淋洗、洗脫等溶劑流速，提高了樣品目標(biāo)物的回收率。
2 儀器與試劑
2.1 儀器
SPE400全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀；HN200多功能氮吹儀；氣相色譜-質(zhì)譜儀：配有負(fù)化學(xué)源；絞肉機(jī)；粉碎機(jī)；分析天平；離心機(jī)；均質(zhì)器；其他常規(guī)玻璃儀器；濾膜（有機(jī)相，0.22μm）。
SPE 400全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀
2.2試劑及耗材
實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682中三級(jí)用水的規(guī)格，使用試劑除特殊說明外，均為分析純。
正己烷（色譜純）；乙腈（色譜純）；丙酮（色譜純）；
氯化鈉：650℃灼燒4h，置于干燥器中冷卻，備用。
丙酮+正己烷（3+7）：取300ml丙酮，加入700ml正己烷，搖勻備用。
PSA固相萃取小柱：丙基乙二胺鍵合硅膠，500mg/3ml。
氟蟲腈標(biāo)準(zhǔn)品：純度≧96.5%。
氟蟲腈標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品，用少量的丙酮溶解，并以丙酮配制成濃度為1.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。根據(jù)需要再用丙酮+正己烷稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。保存于-18℃環(huán)境下。
3實(shí)驗(yàn)方法
3.1取樣
取適量雞蛋樣品進(jìn)行勻漿，以備待用。
3.2提取
稱取勻漿后的雞蛋試樣5g于50ml具塞離心管中，加入5ml水，準(zhǔn)確加入20ml乙腈，用勻漿機(jī)勻漿10min。再加入2.5g氯化鈉，劇烈振蕩10min，3000r/min，離心10min，取上清液備用。
3.3液-液分配凈化
取上層清液10ml轉(zhuǎn)移至50ml具塞離心管中，加入10ml正己烷，振搖3min，靜置分層，棄去上層正己烷相，再用10ml正己烷重復(fù)此操作一次，棄去正己烷；下層乙腈相收集，并在氮吹儀上以40℃濃縮近干，加入1.0ml丙酮+正己烷（3+7）溶解殘?jiān)鳛閭溆靡骸?/span>
3.4固相萃取小柱凈化（PSA柱）
表1 固相凈化條件
進(jìn)樣口溫度：250℃；
色譜-質(zhì)譜接口溫度：280℃；
載氣：氦氣，純度≧99.999%，恒壓模式，柱頭壓1.45MPa；
進(jìn)樣量：1μL；
進(jìn)樣方式：無分流進(jìn)樣，0.65min后開閥；
電離方式：負(fù)化學(xué)電離；
離子源溫度：150℃；
四級(jí)桿溫度：150℃；
反應(yīng)氣：甲烷，純度≧99.99%；
測(cè)定方式：選擇離子監(jiān)測(cè)方式；
選擇監(jiān)測(cè)離子（m/z)：定量366，定性333、368、400；
溶劑延遲：4.0min。
3.6 氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)及確證
根據(jù)樣液中被測(cè)物含量情況，選定濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液與樣液等體積參插進(jìn)樣測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和待測(cè)樣液中氟蟲腈的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)。
如果樣液與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的選擇離子色譜圖中，在相同保留時(shí)間有色譜峰出現(xiàn)，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選離子均出現(xiàn)，所選擇離子的豐度比與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)應(yīng)離子的豐度比，其值在允許范圍內(nèi)（允許范圍見表1）。在測(cè)試條件下，氟蟲腈保留時(shí)間是11.1min，其監(jiān)測(cè)離子（m/z)為m/z366、333、368、400（其豐度比為100:27:70:35）對(duì)其進(jìn)行確證；根據(jù)定量離子m/z366對(duì)其進(jìn)行外標(biāo)法定量。
表1 使用定性氣相色譜-質(zhì)譜時(shí)相對(duì)離子豐度最大容許誤差
式中：
X——試樣中氟蟲腈殘留量，單位為mg/Kg;
h——樣液中氟蟲腈的色譜峰高，單位為mm;
hs——標(biāo)準(zhǔn)工作液中氟蟲腈的色譜峰高，單位為mm；
C——標(biāo)準(zhǔn)工作液中氟蟲腈的濃度，單位為μg/mL;
V——樣液最終定容體積，單位為mL;
M——最終樣液所代表的試樣質(zhì)量，單位為g。
參考文獻(xiàn)
[1] SN/T 1982-2007 進(jìn)出口食品中氟蟲腈殘留量檢測(cè)方法 氣相色譜-質(zhì)譜法[S].