凱氏定氮儀測定功能性添加劑中蛋白質(zhì)的含量
1 前言
功能性添加劑主要成分為酪蛋白酸鈉和黃原膠、單甘酯、卡拉膠等。酪蛋白酸鈉以脫脂奶粉為原料，用凝乳酶或酸(鹽酸、硫酸等)沉淀法制得生酪蛋白，經(jīng)脫水、膨潤、中和，再噴霧干燥或凍干制得。酪蛋白酸鈉含有人體所需的各種氨基酸，營養(yǎng)價值很高，也可作為營養(yǎng)強化劑食用。本實驗原理為樣品與濃硫酸和硫酸銅、硫酸鉀一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨，然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，最后計算得出蛋白質(zhì)的含量。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1100F全自動凱氏定氮儀，SH420F石墨消解儀
2.2試劑
濃硫酸，20g/L硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，40%氫氧化鈉。
3 實驗方法
3.1取樣
稱取樣品0.3g（精確值0.1mg）左右，使用稱量紙包好放入消化管內(nèi)。加入混合催化劑3gK2SO4、0.2gCuSO4，加入12ml濃硫酸。
3.2消解
利用石墨消解爐進(jìn)行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統(tǒng)，消化完畢后，將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式，設(shè)定消解參數(shù)：
3.3測試
將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設(shè)置程序如下：
4 結(jié)果與討論
4.1實驗結(jié)果
4.2結(jié)論
以上實驗數(shù)據(jù)顯示，使用K1100F凱氏定氮儀測定功能性添加劑中的粗蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)平行性明顯優(yōu)于《GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)含量測定》標(biāo)準(zhǔn)要求的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。
參考文獻(xiàn)
[1] GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定[S].
注意事項
測試樣品為粉末狀固體，為了保證取樣均勻性，取樣前應(yīng)將樣品充分混合均勻。