凱氏定氮法測(cè)定人血白蛋白中的蛋白氮含量
1 前言
人血白蛋白是由健康人血漿，經(jīng)過(guò)低溫乙醇蛋白質(zhì)分離法或經(jīng)批準(zhǔn)的其他分離法分離純化，并經(jīng)60℃10小時(shí)加溫滅活病毒后制成。其中蛋白質(zhì)含量是其需要檢定的指標(biāo)之一，本實(shí)驗(yàn)參照藥典中的方法使用全自動(dòng)凱氏定氮儀對(duì)其蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1100F全自動(dòng)凱氏定氮儀，SH420F石墨消解儀，分析天平。
2.2試劑
硫酸（分析純），20g/L硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，40%氫氧化鈉。
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1樣品制備
3.1.1非蛋白氮供試品溶液的制備
精密量取供試品2mL，加水14mL，10%鎢酸鈉溶液2mL，0.33moL/L硫酸溶液2mL，搖勻，靜置30分鐘，過(guò)濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為非蛋白氮供試溶液。
3.1.2總氮供試品溶液的制備
取混合好的供試品，精確量取2.5mL，置10mL容量瓶中，用水稀釋到刻度，作為總氮供試品溶液。
3.2取樣
分別精確量取1mL制備好的總氮溶液及1mL非蛋白氮溶液加入消化管中，各加入0.3g硫酸鉀與30%硫酸銅水溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml。
3.3消解
4 測(cè)試結(jié)果
4.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表3 人血白蛋白中氮含量的測(cè)試數(shù)據(jù)
蛋白氮含量=（32.248-0.29）×6.25=199.7375mg/mL
4.2結(jié)論
從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看到，采用K1100F凱氏定氮儀可以準(zhǔn)確的檢測(cè)人血白蛋白中的總氮含量。樣品中非蛋白氮含量較低，可能會(huì)影響結(jié)果平行性。
參考文獻(xiàn)
[1] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[ M ] . 四部. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2015: 附錄0731蛋白質(zhì)含量測(cè)定 第一法 凱氏定氮法