凱氏定氮法測定破傷風(fēng)抗毒素中的蛋白氮含量
1 前言
破傷風(fēng)抗毒素是由破傷風(fēng)類毒素免疫馬所得的血漿，經(jīng)胃酶消化后純化制成的液體抗毒素球蛋白制劑，用于預(yù)防和治療破傷風(fēng)梭菌引起的感染。其中蛋白質(zhì)含量是其需要檢定的指標(biāo)之一，本實驗參照藥典中的方法使用全自動凱氏定氮儀對其蛋白質(zhì)含量進行測定。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1100F全自動凱氏定氮儀，SH420F石墨消解儀，分析天平。
2.2試劑
硫酸（分析純），20g/L硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，40%氫氧化鈉。
3 實驗方法
3.1樣品制備
3.1.1非蛋白氮供試品溶液的制備
精密量取供試品2mL，加水14mL，10%鎢酸鈉溶液2mL，0.33moL/L硫酸溶液2mL，搖勻，靜置30分鐘，過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為非蛋白氮供試溶液。
3.1.2總氮供試品溶液的制備
取混合好的供試品，精確量取2mL，置10mL容量瓶中，用水稀釋到刻度，作為總氮供試品溶液。
3.2取樣
分別精確量取1mL制備好的總氮溶液及2mL非蛋白氮溶液加入消化管中，各加入0.3g硫酸鉀與30%硫酸銅水溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml。
3.3消解
4 測試結(jié)果
4.1實驗結(jié)果
表3 破傷風(fēng)抗毒素中氮含量的測試數(shù)據(jù)
蛋白氮含量=（7.05-0.07）×6.25=43.625mg/mL
4.2結(jié)論
從實驗結(jié)果可以看到，采用K1100F凱氏定氮儀可以準(zhǔn)確的檢測破傷風(fēng)抗毒素中的總氮含量。由于樣品中非蛋白氮含量較低，因此可能會影響結(jié)果平行性。
參考文獻
[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[ M ] . 四部. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2015: 附錄0731蛋白質(zhì)含量測定 第一法 凱氏定氮法