電位滴定儀-凱氏定氮儀聯(lián)用檢測(cè)蛋白粉中的蛋白質(zhì)含量
1.前言
所謂蛋白粉，一般是采用提純的大豆蛋白、酪蛋白、乳清蛋白(缺乏異亮氨酸)、豌豆蛋白或上述幾種蛋白的組合(如大豆蛋白、乳清蛋白和豌豆蛋白組成的復(fù)合蛋白)構(gòu)成的粉劑，蛋白質(zhì)是保證機(jī)體健康最重要的營(yíng)養(yǎng)素，它是維持和修復(fù)機(jī)體以及細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的，不僅影響機(jī)體組織如肌肉的生長(zhǎng)，還參與激素的產(chǎn)生、免疫功能的維持、其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧的轉(zhuǎn)運(yùn)以及血紅蛋白的生成、血液凝結(jié)等多方面。但是蛋白質(zhì)攝入過(guò)多，不但是一種浪費(fèi)，而且對(duì)人體健康也是有危害的。
2.實(shí)驗(yàn)原理
食品中的蛋白質(zhì)在催化加熱條件下被分解，產(chǎn)生的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后用硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)的含量。
3.實(shí)驗(yàn)儀器
石墨消解爐，K9840凱氏定氮儀，T960電位滴定儀
4.實(shí)驗(yàn)試劑
滴定劑:C(H2SO4))=0.100mol/L, 滴定劑的濃度按照國(guó)標(biāo)標(biāo)定、硼酸溶液(20g/l)、甲基紅-溴甲酚綠乙醇混合溶液：1：5、催化劑片(硫酸銅0.2g，硫酸鉀3g)、蛋白粉(市售)
5.測(cè)定方法
1)樣品制備
萬(wàn)分之一天平稱取0.2g蛋白粉樣品(精確到0.1mg)，無(wú)屑稱量紙包好一并投入300ml消化管中。
2)消解
消化管中加入一片催化劑片(硫酸銅0.2g，硫酸鉀3g)和10ml濃硫酸，輕輕搖動(dòng)使充分混合，并作空白實(shí)驗(yàn)。消化管架放置在石墨爐上，蓋上廢氣罩，并打開(kāi)廢棄吸收系統(tǒng)。消化管采用曲線升溫模式，200℃維持20min460℃維持60min左右。消化完成后，取出消化管，冷卻至室溫。
3)蒸餾
K9840凱氏定氮儀清洗空蒸結(jié)束后，按標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置好儀器，將消化好的樣品安裝在儀器上蒸餾。
4)滴定
吸收液在電位滴定儀T960上用0.1mol/l的硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液滴定至終點(diǎn)。
5.測(cè)試結(jié)果
1)參數(shù)設(shè)置
蒸餾參數(shù)設(shè)置：
該蛋白粉中含氮量平均值為13.25%，蛋白質(zhì)量平均值為82.80%。
7.參考文獻(xiàn)
1) GB/T 601- 2002 化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備[S].北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2003.
2)GB 5009.5-2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定第一法凱氏定氮法.